Étude comparative de la sensibilité de différentes méthodes de diagnostic pour le diagnostic en laboratoire de la maladie de l’ulcère de Buruli

Contexte Plusieurs méthodes de laboratoire de diagnostic sont disponibles pour la confirmation de l’ulcère de Buruli. Cette étude a évalué la sensibilité de divers tests diagnostiques en relation avec la présentation clinique de la maladie, le type de spécimen diagnostique et les antécédents de traitement. et des échantillons de tissus excisés chirurgicalement chez des individus suspectés d’ulcère de Buruli ont été obtenus à différents sites d’étude au Ghana et évalués avec une réaction en chaîne par polymérase à base de réactif sec PCR, examen microscopique, culture et analyse histopathologique Les sujets non ulcératifs et ulcéreux et ont été divisés en groupes de traitement: patients non traités auparavant pour un traitement antimycobactérien, patients traités uniquement par chirurgie, et patients traités par chirurgie en association avec un traitement antimycobactérien antérieur. Les résultats des cas suspects de la maladie de l’ulcère de Buruli ont été confirmés par Résultat du test au moins positif La sensibilité globale du PCR% était significativement plus élevée que celle de l’examen microscopique% et culture% Après stratification des données par groupe de traitement, type de lésion et type de spécimen diagnostique, l’analyse a révélé une PCR du tissu de biopsie Les spécimens obtenus à partir de lésions non ulcéreuses non traitées et d’écouvillonnages obtenus à partir d’ulcères non traités présentaient la plus haute sensibilité diagnostique% et%, respectivement. Bien que la durée de la maladie n’influence pas significativement la sensibilité d’un test, le traitement antimycobactérien antérieur était significativement associé à La PCR a eu la sensibilité la plus élevée. L’évaluation par PCR de spécimens de tissu de biopsie à l’emporte-pièce s’est révélée être le meilleur outil diagnostique pour les lésions non ulcératives et l’évaluation PCR des échantillons sur écouvillon était le meilleur outil diagnostique des lésions ulcératives. traitement antimycobactérien succès dans les essais contrôlés, cependant, seule la culture est appropriée

La maladie de l’ulcère de Buruli BUD, qui est causée par Mycobacterium ulcerans, affecte la peau et le tissu adipeux sous-cutané BUD se produit dans & gt; La maladie se manifeste initialement sous la forme d’un nodule indolore, d’une papule, d’une plaque ou d’un œdème et évolue vers un ulcère indolore aux contours caractéristiques. Si elle n’est pas traitée, cicatrisation et les contractures peuvent causer des incapacités fonctionnelles graves Auparavant, BUD a été traité avec une large excision chirurgicale; Cependant, le traitement antimycobactérien seul ou en combinaison avec la chirurgie a été introduit Les tests de laboratoire diagnostiques actuellement disponibles comprennent l’examen microscopique, la culture, la PCR des prélèvements sur écouvillon et des prélèvements tissulaires, et l’analyse histopathologique selon diverses études. l’examen microscopique détecte% -% des cas d’IUN, et la culture détecte% -% traitement antimycobactérien avant la collecte des échantillons a été montré pour réduire les rapports de positivité culture, à savoir, le nombre de résultats positifs divisés par le nombre de cas suspectés cliniquement L’analyse histopathologique a confirmé>% de cas d’IUD cliniquement diagnostiqués et>% de cas d’IUD suspectés cliniquement Avec une spécificité analytique de% , une sensibilité de% -% et une positivité de la culture rapports de% -% , IS La PCR est considérée comme la technique la plus fiable pour la détection des ulcères de M dans les diagnostics humains. L’analyse en laboratoire des lésions non ulcéreuses est limitée à l’analyse des prélèvements tissulaires, tandis que les prélèvements diagnostiques par écouvillonnage constituent une alternative valable pour l’évaluation des lésions ulcéreuses. Selon des données récentes du Ghana, l’examen microscopique et / ou PCR des écouvillons permet de confirmer jusqu’à L’Organisation mondiale de la Santé a recommandé que des résultats positifs aux tests de laboratoire soient obtenus pour confirmer un diagnostic positif Cependant, la confirmation en laboratoire de cas suspects de BUD par un résultat positif donne ~% de cas confirmés de plus que confirmation par des résultats de tests positifs En raison des valeurs prédictives positives élevées de% de PCR et de% d’examen microscopique, un résultat de test positif est considéré comme suffisant pour confirmer un diagnostic de BUD Un résultat positif est également considéré comme une preuve adéquate pour commencer un traitement antimycobactérien En plus des échantillons sur écouvillon, Cependant, les données sur l’utilisation diagnostique des prélèvements de tissus par biopsie à la perforation sont encore rares. Phillips et al ont signalé des sensibilités de% pour l’examen microscopique,% pour la culture,% pour la PCR de l’IS Dans le cadre d’un programme de recherche financé par la Commission européenne sur le diagnostic et le traitement antimycobactérien de l’IUN, différents types d’échantillons de diagnostic ont été obtenus chez des patients présentant des formes cliniques différentes. Les objectifs de cette étude étaient de déterminer la sensibilité des méthodes de laboratoire de diagnostic pour différents types d’échantillons, en fonction du type de lésions et des antécédents de traitement.

Patients, matériaux et méthodes

Population étudiée et critères d’inclusion L’étude incluait des personnes suspectes de BUD qui présentaient des lésions non ulcératives ou ulcératives et ont été vues de janvier à février sur différents sites d’étude au Ghana. Les sujets de l’étude appartenaient à différents groupes de traitement: les patients qui devaient suivre un traitement médicamenteux n’avaient pas reçu de traitement antimycobactérien avant le prélèvement des échantillons, avaient une durée de maladie de ⩽ mois, avaient des lésions de ⩽ cm de diamètre et avaient ⩾ ans; le groupe de traitement chirurgical, qui comprenait des patients qui avaient été traités par excision chirurgicale et n’avaient reçu aucun traitement antimycobactérien antérieur; et le traitement chirurgical plus le groupe de traitement antimycobactérien, qui comprenait des patients qui ont été traités avec une excision chirurgicale et avaient reçu au moins jours de traitement antimycobactérien antérieur. Collection d’échantillons standardisés Dans la majorité des cas, les échantillons de diagnostic ont été recueillis Pour un nombre limité de patients, des échantillons de suivi supplémentaires ont été analysés. Des échantillons d’écouvillonnage ont été prélevés en entourant l’ensemble des bords lésés des lésions ulcéreuses. Des échantillons de tissus de biopsie perforée de 3 millimètres et des échantillons tissulaires chirurgicalement excisés d’une taille maximale de × mm ont été prélevés. centre des lésions non ulcératives ou des bords lésés des lésions ulcératives, y compris les tissus nécrosés Les séries suivantes de prélèvements ont été réalisées: pour ceux du groupe de traitement médicamenteux présentant des lésions non ulcératives, des spécimens de biopsie à l’emporte-pièce; pour ceux dans le groupe de traitement de drogue avec les lésions ulcératives, les échantillons d’écouvillon et les échantillons de biopsie de coup de poing; pour ceux dans le groupe de traitement chirurgical et le traitement chirurgical plus le groupe de traitement antimycobactérien avec les lésions non ulcératives, les spécimens de tissu chirurgicalement excisés; et pour ceux dans le groupe de traitement chirurgical et traitement chirurgical plus groupe de traitement antimycobactérien avec des lésions ulcéreuses, des échantillons sur écouvillon et des spécimens de tissus excisés chirurgicalement obtenus lors de la procédure chirurgicale Figure standard sacs de collecte d’échantillons, y compris les conteneurs avec transport et supports de stockage et Les échantillons de PCR ont été recueillis en μL de solution de lyse cellulaire Gentra Systems, les échantillons de culture ont été recueillis en mL de polymyxine B, l’amphotéricine B, l’acide nalidixique, le triméthoprime et l’azlocilline, et des échantillons histologiques ont été recueillis. recueilli en mL de% de formaline neutre tamponnée

Au cours de visites de suivi, on a confirmé la présence d’ulcère de Buruli chez des patients ayant une EIU soupçonnée d’avoir des résultats négatifs lors de la première présentation ** Vingt-six patients du groupe DT ayant un IUD présumé non confirmé en laboratoire Les patients atteints de lésions ulcéreuses ont reçu un traitement antimycobactérien, car les résultats cliniques suggéraient un BUD oxygénation. Trois patients supplémentaires suspectés d’avoir un IUN dans le groupe DT ont reçu un traitement pour l’onchocercose. Les patients restants du groupe DT avec suspicion d’IUN ont été perdus de vue. Diagramme de la procédure d’étude Echantillons d’écouvillons, écouvillons de biopsie à l’emporte-pièce et tissus prélevés chirurgicalement obtenus à partir de patients suspectés d’ulcère de Buruli BUD provenant de différents groupes de traitement. ], un traitement chirurgical sans traitement antimycobactérien antérieur [ST], et un traitement chirurgical avec un traitement antimycobactérien antérieur [ST] pour les tests de diagnostic BUD avec PCR PCR à base de réactif sec, microscopie MIC, culture avec PCR CUP confirmée à base de réactif sec, et analyse histopathologique HIS Il y avait un total de cas confirmés en laboratoire de BUD A et les cas suspects de BUD sans confirmation de laboratoire B Les statistiques sont basées sur les données obtenues à partir de la première lésion de chaque patient s’il y a eu & gt; lésion par patient et première visite de chaque patient à l’hôpital s’il y avait eu & gt; visite par patient * Quatre des patients avec un BUD soupçonné qui présentaient des résultats négatifs lors de la présentation initiale dans le groupe ST et dans le groupe DT ont eu un BUD confirmé lors des visites de suivi ** Vingt-six patients du groupe DT avec un BUD suspecté Les patients non confirmés avec des lésions non ulcératives et les patients présentant des lésions ulcéreuses ont reçu un traitement antimycobactérien, car les résultats cliniques suggéraient un BUD. Trois patients supplémentaires avec un BUD suspecté dans le groupe DT ont reçu un traitement pour l’onchocercose. Méthodes de laboratoire et méthodes de diagnostic Les échantillons de diagnostic ont été traités au Centre Kumasi de recherche collaborative en médecine tropicale de Kumasi, au Ghana, par PCR à base de réactif sec, examen microscopique et culture avec utilisation de procédures normalisées [, -] Standard IS La PCR a été effectuée et les lames ont été relues pour l’assurance qualité externe par le Département L’examen histopathologique a été réalisé à l’Institut Bernhard Nocht de médecine tropicale de Hambourg, en Allemagne, et au Département de pathologie de l’Université de Munich [,,]. En bref, l’ADN a été préparé. en utilisant le kit d’isolation Puregene DNA, avec des modifications mineures Pour la PCR à base de réactif sec, les oligonucléotides MU et MU ont été lyophilisés dans des tubes réactionnels. La PCR standard a été réalisée selon le protocole décrit par Stinear et al Les deux tests PCR comprenaient une extraction négative et des contrôles positifs, négatifs et d’inhibition. Des échantillons de culture ont été décontaminés par la méthode Petroff, inoculés sur milieu Loewenstein-Jensen et incubés à ° C pendant des mois Les frottis de microscopie ont été préparés à partir de matériel décontaminé et ont été colorés avec le techniq de Ziehl-Neelsen. ue Les cultures avec croissance ont été soumises à une coloration de Ziehl-Neelsen et à une PCR de confirmation Si un résultat de PCR négatif a été obtenu, analyse des séquences des paires de bases du gène rpoB, ARN ribosomique S-S ARNr transcrits internes Des paires de bases génétiques et des paires de bases du gène -kDa HSP ont été réalisées pour l’identification des souches Définition de la sensibilité pour chaque test individuel Dans cette étude, la sensibilité d’un test donné était divisée par le nombre de tests positifs. patients avec un résultat au moins positif de tout test de diagnostic Analyse statistique Tests approximatifs χ; tests, tests exacts Les tests exacts de Fisher, et les tests t de Student en tant que test paramétrique ont été effectués en utilisant le logiciel Stata, version Stata Des différences statistiquement significatives ont été définies comme valeurs P & lt; ou en% sans chevauchement des proportions Les variables dépendantes étaient les résultats des tests de diagnostic Type de lésion, durée de la maladie, durée du traitement antimycobactérien si prétraitement avant le prélèvement des échantillons et type de spécimen de diagnostic étaient des variables indépendantes Autorisation légale et consentement éclairé du patient cherchée par le Comité de recherche humaine et éthique, Université des sciences et technologies Kwame Nkrumah, et l’hôpital universitaire Komfo Anokye, Kumasi, Ghana Le consentement éclairé du patient a été utilisé pour les patients ayant reçu un traitement médicamenteux et pour les patients ayant subi une intervention chirurgicale

Résultats

Sujets Quatre cents séries de spécimens d’individus avec un groupe de traitement médicamenteux BUD soupçonné, patients; groupe de traitement chirurgical, patients; et traitement chirurgical plus groupe de traitement antimycobactérien, les patients qui ont présenté des% non ulcératif et ulcératif% des lésions ont été recueillies lors de la première présentation à l’hôpital Seize patients avaient des lésions Un total de séries de spécimens de suivi ont été obtenus des sujets d’étude; cependant, seules les données provenant de la collecte initiale des échantillons des patients ont été prises en compte pour l’analyse. Quarante-huit pour cent des suspects étaient âgés de – ans, – ans; âge moyen, années; âge médian, années; % des patients étaient des hommes Nombre de cas d’IUN confirmés en laboratoire Cent soixante-douze pour cent des cas d’IUN ont été confirmés par des résultats d’analyses de laboratoire au moins positifs; % ont été confirmés par des résultats de tests de laboratoire au moins positifs. Cent quatorze pour cent des patients avec BUD présentaient des lésions non ulcératives, et% présentaient des lésions ulcératives; % des patients étaient des hommes, et% des patients pour les patients, l’âge était inconnu étaient – années d’âge, – ans; âge moyen, années; âge médian, nombre d’années En% des patients, les lésions étaient localisées sur les membres ou les épaules, le côté droit étant statistiquement significativement affecté plus souvent chez [%] des patients; P = que le côté gauche [%] du tableau des patients Les lésions des patients avec des cas confirmés avec des tailles de lésions connues ont été distribués selon les catégories de l’Organisation mondiale de la santé , comme suit: catégorie I une seule lésion & lt; cm de diamètre, patients%, y compris dans le groupe de traitement médicamenteux, dans le groupe de traitement chirurgical, et dans le groupe de traitement chirurgical plus traitement antimycobactérien; catégorie II une seule lésion – cm de diamètre, patients%, y compris dans le groupe de traitement médicamenteux, dans le groupe de traitement chirurgical, et dans le groupe de traitement chirurgical plus traitement antimycobactérien; et la catégorie III une seule lésion & gt; diamètre de cm, lésions multiples, ou ostéomyélite, patients%, y compris dans le groupe de traitement médicamenteux, dans le groupe de traitement chirurgical, et dans le groupe de traitement chirurgical plus traitement antimycobactérien

Figure Vue largeTéléchargement diapositive Répartition des patients atteints d’ulcère de Buruli confirmé en laboratoire BUD Pour les patients, l’âge était inconnu La tranche d’âge était – années, l’âge moyen était ans, et l’âge médian était ans Pour le groupe de patients ayant reçu un traitement médicamenteux, patients avec soupçonné BUD qui étaient & lt; les années d’âge ne sont pas incluses Pour le traitement chirurgical sans groupe précédent de traitement antimycobactérien et le traitement chirurgical avec le groupe de traitement antimycobactérien précédent, les patients avec suspicion d’IUN ont été inclus indépendamment de l’âgeFiguration large des patients atteints d’ulcère de Buruli confirmé en laboratoire , l’âge était inconnu La fourchette d’âge était de – ans, l’âge moyen était de plusieurs années et l’âge médian était de plusieurs années. Pour le groupe de patients ayant reçu un traitement médicamenteux, les patients avec un IUD suspecté étaient & lt; les années d’âge n’ont pas été incluses Pour le traitement chirurgical sans groupe de traitement antimycobactérien antérieur et le traitement chirurgical avec le groupe de traitement antimycobactérien précédent, les patients avec suspicion d’IUN ont été inclus indépendamment de l’âge

Tableau View largeTélécharger slideLocalisation des lésions non ulcératives et ulcéreuses en cas d’ulcère de Buruli confirmé en laboratoireTable View largeTélécharger slideLocation de lésions non ulcératives et ulcéreuses en cas d’ulcère de Buruli confirmé en laboratoireSur des patients avec BUD avec un résultat de test positif au moins positif,% ont un résultat positif Échantillon d’écouvillon et / ou échantillon de tissu avec un résultat de PCR positif, et% avaient un écouvillon positif et / ou un échantillon de tissu avec des résultats de microscopie positifs Cent quarante-neuf pour cent des échantillons avec des résultats positifs au microscope ont été confirmés par au moins des autres tests Des isolats obtenus à partir d’échantillons d’écouvillons et / ou de cultures de prélèvements tissulaires avec des résultats positifs, les isolats ont été confirmés par la valeur prédictive positive de la PCR,% Parmi les isolats restants, l’analyse séquentielle a identifié les souches M ulcerans mucogenicum et Mycobacterium phocaicum, indiquant Pour les isolats, le séquençage n’a pas fourni d’identification définitive, probablement en raison de la contamination par des espèces étroitement apparentées qui colonisent la peau humaine. Parmi les échantillons de suivi, le séquençage de souches identifiées comme Mycobacterium gordonae cultivées à partir d’un échantillon d’ulcère Résultats positifs de la PCR et Mycobacterium szulgai isolés d’une lésion supplémentaire à un autre endroit chez un patient dont la lésion initiale présentait un écouvillon avec des résultats positifs à la PCR IS Les résultats de l’examen histopathologique ont confirmé des échantillons de tissus provenant d’individus présentant une sensibilité au BUD confirmée en laboratoire. Pourcentage de spécimens provenant d’individus avec suspicion d’ulcère et présentant des résultats négatifs en microscopie, culture négative et PCR [%] de ces spécimens ont été obtenus à partir de lésions en phase de cicatrisation. En% des cas suspects, les caractéristiques histopathologiques ne permettaient pas d’identifier dia gnose, et les résultats histologiques en% ne suggéraient pas de BUD de ces patients a reçu un diagnostic d’onchocercose Des spécimens manquants ou de mauvaise qualité n’ont pas permis l’analyse histopathologique pour les individus restants avec des individus suspects de BUDOf qui ont été suivis au fil du temps, BUD lors de leur première présentation à l’hôpital Parmi les sujets restants, le BUD a confirmé lors des visites de suivi suivantes L’assurance qualité externe pour l’examen microscopique et la PCR ont montré une concordance de la table de résultats>%

Tableau View largeTouche de slideAssurance qualité externe pour la PCR et l’examen microscopiqueTable View largeDownload slideAssurance qualité externe pour la PCR et l’examen microscopiqueSensibilités générales des tests de laboratoire parmi tous les cas d’IUD confirmés en laboratoire Les sensibilités globales étaient% de cas pour PCR,% de cas pour examen microscopique, et % de cas pour la PCR de confirmation La sensibilité de la PCR était significativement plus élevée que celle de l’examen microscopique et de la PCR de confirmation P & lt ;, sans différence statistiquement significative entre l’examen microscopique et la PCR confirmatoire IS P = tableau

Tableau View largeTélécharger diapositiveSensibilité de différentes méthodes pour le diagnostic des lésions ulcéreuses et ulcéreuses de l’ulcère de Buruli BUD, par méthode de spécimen et groupe de traitementTable View largeDownload slideSensibilité de différentes méthodes pour le diagnostic des lésions ulcéreuses et ulcéreuses de l’ulcère de Buruli BUD, par méthode de spécimen et groupe de traitementSensibilité des tests de laboratoire parmi les cas confirmés d’IUN impliquant des lésions non ulcératives Parmi les cas confirmés d’ulcère de Buruli non ulcératif groupe de traitement médicamenteux, cas; groupe de traitement chirurgical, cas; traitement chirurgical plus groupe de traitement antimycobactérien, cas, les sensibilités étaient% de spécimens pour PCR,% de spécimens pour examen microscopique, et% de spécimens pour analyse de confirmation IS PCR de spécimens tissulaires PCR était significativement plus sensible que l’examen microscopique et confirmatoire IS PCR P & lt ; Pour chaque groupe stratifié et échantillons, les sensibilités pour l’analyse des échantillons de tissus de biopsie au poinçon du groupe de traitement médicamenteux étaient de% pour la PCR et de% pour la PCR de confirmation, qui était statistiquement significativement plus élevée que pour les échantillons de tissu chirurgical excisés dans le traitement chirurgical. tableau de groupe Sensibilité des tests de laboratoire chez les patients présentant des lésions ulcéreuses confirmées et des ulcérations Parmi les cas confirmés en laboratoire de groupe de traitement médicamenteux ulcéreux BUD, cas; groupe de traitement chirurgical, cas; traitement chirurgical plus groupe de traitement antimycobactérien, cas, les sensibilités étaient% de spécimens pour PCR,% de spécimens pour examen microscopique, et% de spécimens pour analyse de confirmation IS PCR des échantillons sur écouvillon et échantillons de tissus PCR était statistiquement significativement plus sensible que l’examen microscopique et confirmation IS PCR P & lt; stratifiés en groupes de traitement et échantillons, les sensibilités pour l’analyse par PCR des échantillons sur écouvillon étaient de% pour le groupe traitement médicamenteux,% pour le groupe traitement chirurgical, et% pour le groupe traitement chirurgical + traitement antimycobactérien. pour les échantillons sur écouvillon que pour les spécimens de tissu de biopsie à l’emporte-pièce% ou les échantillons de tissu excisés chirurgicalement groupe de traitement chirurgical,%; traitement chirurgical plus groupe de traitement antimycobactérien,% tableau Sensibilité des tests de laboratoire chez les patients présentant des lésions ulcératives sans traitement antimycobactérien préalable en fonction de la durée de la maladie Selon la durée de la maladie, les patients avec des ulcérations en groupes Dans tous les groupes, la PCR des écouvillons avait une sensibilité statistiquement significativement plus élevée% -% que l’examen microscopique des écouvillons% -% ou PCR confirmatoire des écouvillons% -% Malgré une légère tendance à la baisse, aucune association statistiquement significative la sensibilité du test et la durée de la maladie pour tout test a été trouvé figure

Figure View largeDownload slideSensibilité des tests de diagnostic à base de réactif sec [DRB] IS PCR, examen microscopique et culture plus confirmation DRB IS PCR par durée de la maladie chez les patients avec ulcère de Buruli confirmé en laboratoire et lésions ulcératives n’ayant pas reçu de traitement antibiotique antérieur échantillons sur écouvillon provenant de patients du groupe de traitement médicamenteux et échantillons sur écouvillon de patients sous traitement chirurgical sans groupe de traitement antimycobactérien préalable Aucun patient n’a signalé une durée de –mois de maladie Voir la grande diapositiveTéléchargementSensibilité des tests de diagnostic à base de réactif sec [DRB] IS PCR, microscopique PCR et durée de la maladie chez les patients présentant une ulcère de Buruli confirmé en laboratoire et des lésions ulcératives n’ayant pas reçu d’échantillons antécédents d’antibiotiques sur des patients du groupe de traitement médicamenteux et des écouvillons prélevés sur des patients traités chirurgicalement. sans antimycobac antérieur Aucun test n’a été rapporté sur la durée du traitement. La sensibilité au test était en corrélation avec la durée du traitement antimycobactérien précédent. durée du traitement antimycobactérien précédent Indépendamment de la durée du traitement, la PCR a toujours été le test le plus sensible. Les sensibilités de la PCR et de la PCR confirmatoire étaient statistiquement significativement plus élevées dans le groupe des patients non traités que dans le groupe traité par & gt; jours pour la PCR ou & gt; jours pour la confirmation de l’IS PCR Aucune différence statistiquement significative n’a été trouvée pour l’examen microscopique

Figure View largeDownload slideSensibilité des tests de diagnostic à base de réactif sec [DRB] PCR, microscopie et culture plus confirmation DRB IS PCR chez les patients avec des cas d’ulcère de Buruli confirmés en laboratoire ayant reçu un traitement chirurgical avec un traitement antimycobactérien antérieur avec ulcération lésions, stratifiées par la durée du traitement antimycobactérien précédent – jours, patients; – jours, patients; F jours, patients Un total de patients n’a reçu aucun traitementFigure de largeDownload slideSensibilité des tests de diagnostic à base de réactif sec [DRB] IS PCR, microscopie et culture plus confirmation DRB IS PCR chez les patients avec des cas confirmés en laboratoire de l’ulcère de Buruli traitement avec un traitement antimycobactérien antérieur avec preulcerative et avec des lésions ulcéreuses, stratifié par la durée du traitement antimycobactérien précédent – jours, patients; – jours, patients; ⩾ jours, patients Un total de patients n’a reçu aucun traitement

Discussion

Les résultats de la PCR en fonction du gent, de l’examen microscopique et de la PCR confirmatoire, tels que déterminés dans notre étude, sont comparables aux données publiées par d’autres groupes. Indépendamment du groupe de traitement, type de lésion ou La PCR était statistiquement significative P & lt; supérieure à celle de tout autre test, alors qu’il n’y avait pas de différence statistiquement significative entre l’examen microscopique et la confirmation par PCR. P = La majorité des isolats mycobactériens ont été confirmés être des ulcères par PCR ou autres méthodes. Étant donné que ces souches n’ont été isolées que chez ces patients, la contamination en laboratoire est improbable. En l’absence d’autres tests de confirmation ou de croissance mycobactérienne persistante après traitement médicamenteux, la confirmation par des méthodes moléculaires est importante pour identifier les coïncidences ou superinfections dues. Le pourcentage de sensibilité de la PCR réalisée sur des échantillons de tissu prélevés par biopsie à l’emporte-pièce prélevés chez des patients non traités dans le groupe de traitement médicamenteux qui présentaient des lésions non ulcéreuses était significativement plus élevé que la sensibilité de toute autre mycobactérie. diag test nostic Ces données sont en ligne avec le% de sensibilité de PCR des spécimens de biopsie -mm et -mm punch biopsie déterminés par Phillips et al Confirmatory IS PCR des échantillons de tissus de biopsie punch a également fourni une excellente sensibilité de% chez les patients avec BUD qui avait des lésions non ulcératives. Par conséquent, des échantillons de tissu de biopsie à perforation peuvent être recommandés pour le diagnostic prétraitement des patients présentant des lésions non ulcéreuses avant le début du traitement antimycobactérien. Cependant, la petite taille des spécimens de biopsie à perforation entrave l’analyse histopathologique. Les données sur la sensibilité de la PCR des écouvillons obtenus dans cette étude suggèrent également que l’analyse par PCR des écouvillons de diagnostic soit la méthode de choix pour les cas qui impliquent des lésions ulcératives Surtout chez les patients non traités dans le groupe de traitement La sensibilité des échantillons de tissus de la biopsie à l’emporte-pièce a été supérieure à celle des échantillons de tissus prélevés par biopsie à l’emporte-pièce, et celle du groupe de traitement chirurgical et du traitement antimycobactérien. analyse des échantillons de tissus Conformément aux observations précédentes, la sensibilité plus faible des échantillons de tissus prélevés chez des patients ayant subi une intervention chirurgicale peut être attribuée à la difficulté de déterminer le bon emplacement de prélèvement après l’excision Malgré une légère tendance à la baisse, aucune différence statistiquement significative Cependant, selon notre propre expérience, au cours de la maladie, les bords des ulcères développent souvent des cicatrices, ce qui peut nuire à la collecte d’échantillons sur écouvillon. traitement antimycobactérien a influencé les sensibilités diagnostiques de la PCR a Comparaison avec leur sensibilité chez les patients non traités, les sensibilités des deux tests étaient statistiquement significativement plus faibles après traitement Une diminution statistiquement significative de la sensibilité de la culture a été détectée après plusieurs jours de traitement Plus de jours de traitement étaient nécessaires pour produire le même effet PCR Chez les patients prétraités, la sensibilité de la PCR était toujours de%, tandis que la sensibilité de la PCR de confirmation diminuait à%. En contraste avec la diminution rapide de la viabilité des ulcères M dans les premières semaines après le début du traitement, les résultats de PCR suggèrent une persistance prolongée de Cette étude décrit la sensibilité relative des tests diagnostiques actuellement disponibles. Les données sur la spécificité et les valeurs prédictives positives de ces tests ne peuvent être fournies, car l’analyse d’échantillons diagnostiques provenant d’individus sains, y compris des échantillons tissulaires, aurait été nécessaire pour déterminer le nombre de du test de faux positif L’évaluation des valeurs prédictives positives et négatives nécessite une comparaison avec un test de référence En raison de la disponibilité limitée des méthodes de référence, par exemple l’examen histopathologique comme test de référence pour la PCR, la détermination des valeurs prédictives positives et négatives n’a pas été possible. utilisé dans cette étudeSelon les résultats de cette étude, IS PCR était le test ayant la plus grande sensibilité globale et dans tous les sous-groupes de cette cohorte d’étude; par conséquent, il est le plus approprié pour le diagnostic précoce de toutes les formes cliniques de BUD Pour le suivi du succès du traitement antimycobactérien dans des essais contrôlés, cependant, seule la culture semble être l’outil approprié

Remerciements

Soutien financier Projet de la Commission européenne no INCO-CT — BURULICPerspectives d’intérêts potentiels Tous les auteurs: pas de conflits