Une comparaison des charges virales entre les suppresseurs d’élite infectés par le VIH-1 et les personnes qui reçoivent une thérapie antirétrovirale hautement active suppressive

Les suppresseurs d’élite sont des individus non traités avec une infection par le virus de l’immunodéficience humaine de type 1 VIH-1 qui maintiennent des charges virales à 50 copies / mL. traitement antirétroviral hautement actif suppressif ayant des charges virales de <1 copie / mL

Un sous-groupe rare d’individus infectés par le VIH-1, appelés «suppresseurs d’élite», maintient des charges virales inférieures à la limite de détection clinique de 50 copies / mL et des lymphocytes T CD4 normaux sans thérapie antirétrovirale. 50 copies / mL, mais ils le font grâce au traitement antirétroviral [1] Par définition, les deux groupes infectés ont des charges virales cliniquement indétectables mais atteignent ce niveau par différents mécanismes biologiques. Nous avons été capables d’amplifier et de séquencer plusieurs -1 gènes du plasma de patients recevant HAART [2, 3] et de suppresseurs d’élite [4, 5], ce qui suggère qu’une virémie de bas niveau est, en fait, présente dans les deux groupes de patients Maldarelli et al [7] un test de charge virale ultrasensible avec sensibilité à une seule copie, appelé “single-copy assay” [6], et a révélé que les individus avec suppression de la virémie qui reçoivent HAART maintenir une charge virale à l’état d’équilibre. médiane s / mL, 3 copies / mL Ici, dans une étude utilisant des échantillons de plasma archivés, nous avons utilisé le même test pour mesurer et comparer les charges virales chez les suppresseurs d’élite avec ceux des personnes sous multithérapie suppressive. Patients et méthodes Les échantillons de plasma archivés provenant de 14 suppresseurs d’élite et de 15 patients traités par HAART ont été étudiés. Le consentement éclairé a été obtenu à partir de chaque cas. Individus avant la phlébotomie Les suppresseurs d’élite ont été infectés pendant une durée médiane de 13 ans et avaient un nombre moyen de lymphocytes T CD4 de 811 cellules / μL Ils avaient tous des charges virales <50 copies / mL et tous les patients traités par HAART avaient des charges virales <50 copies / ml pendant au moins 6 mois, comme déterminé à l'hôpital Johns Hopkins de Baltimore, Maryland AMPLICOR HIV-1 MONITOR Test, version 15; Roche Pour éviter le biais de sélection, on a utilisé des échantillons des 15 premiers patients répondant à ces critères. Onze de ces patients recevaient un traitement à base d'inhibiteurs non nucléosidiques de la transcriptase inverse, les autres recevaient des schémas thérapeutiques à base d'inhibiteurs de protéase. Le plasma a été séparé du sang par centrifugation en gradient de densité discontinue. Les charges virales ont été mesurées à partir de 7 mL de plasma en utilisant le test de copie unique, un RT-RT en temps réel épiderme. Test basé sur la PCR, tel que décrit ailleurs [6] Le virus a été concentré par ultracentrifugation et a été lysé par traitement à la protéinase K et isothiocynate de guanidinium L’ARN viral a été précipité avec glycogène et isopropanol Après précipitation nucléotidique, le culot nucléotide-glycogène a été lavé avec 70% d’éthanol et a été séché à l’air L’ARN viral extrait a ensuite été remis en suspension avec un tampon à base de Tris ARN viral s quantifié par une RT-PCR quantitative en deux étapes [6] Le test exact de Fisher a été utilisé pour l’analyse statistique de la proportion de charges virales indétectables chez les patients traités par HAART et chez les suppresseurs d’élite. Individus traités par HAART Parmi les 14 suppresseurs d’élite, 9 64% avaient des charges virales indétectables & lt; 1 copie / mL par le test de copie unique Les suppresseurs d’élite restants avaient diverses charges virales mesurables, comme indiqué ailleurs [8], avec un médiane de 25 copies / mL figure 1A Dans la cohorte traitée par HAART, 6 40% des 15 individus avaient des charges virales indétectables par le test de copie unique. Les autres individus avaient des charges virales ⩽4 copies / mL médiane, 2 copies / mL différence dans les proportions de patients dans chaque cohorte qui ont démontré des charges virales indétectables n’était pas statistiquement significative P & gt; 05; cependant, les suppresseurs d’élite ont semblé montrer une plus grande gamme de charges virales que celles observées chez les individus traités par HAART.

atient les triangles ES8 c, CopiesFigure 1View largeTélécharger la diapositive Charge virale VL mesures Les symboles ouverts représentent les charges virales indétectables & lt; 1 copie / mL A, mesures de la charge virale unique chez les sujets élitistes rouges et sujets traités par HAART bleu B, deux mesures de la charge virale Les charges virales de 6 suppresseurs d’élite ont été mesurées dans 2 échantillons de sang séparés à 86 mois d’intervalle. des charges virales suppresseurs d’élite dans 4 échantillons de sang distincts obtenus à partir des cercles patients ES13 et 8 échantillons sanguins distincts obtenus à partir des patients c ES8 triangles, CopiesPour étudier plus loin cette variation des charges virales, une analyse longitudinale a été réalisée avec des échantillons de plasma archivés. Comme le montre la figure 1B, certains suppresseurs d’élite ont maintenu des charges virales indétectables pendant les deux mesures, tandis que d’autres ont eu des changements allant jusqu’à 72 copies / mL. Un échantillonnage plus intensif a été effectué pour 2 autres suppresseurs d’élite avec des charges virales détectables Figure 1C Patient ES8 avait des charges virales qui ont fluctué b entre 12 et 48 copies / mL pendant une période de 337 jours Pour le patient ES13, les charges virales avaient une gamme de 1-62 copies / mL sur 4 mesures distinctes pendant une période de 440 jours. Discussion Nous fournissons des mesures et des comparaisons de charges virales des suppresseurs d’élite De manière surprenante, plus de la moitié des suppresseurs d’élite étudiés avaient des charges virales indétectables malgré des preuves récentes de réplication virale et d’évolution dans les groupes traités par HAART. ces patients [5] Chez les individus traités par HAART, les charges virales ont été trouvées ⩽4 copies / mL médiane, 2 copies / mL Cette observation est similaire aux observations rapportées ailleurs [7] Dans une analyse longitudinale des échantillons archivés, nous avons trouvé que les charges virales dans 1 suppresseur d’élite ont fluctué entre 1 et 87 copies / ml Cette fluctuation est peu susceptible d’être attribuable à la surinfection, parce que nous avons analysé le virus du plasma et des lymphocytes T CD4 au repos de cette Au lieu de cela, il est très probable que ces observations dans les suppresseurs d’élite peuvent être attribuées aux différences individuelles dans la réponse immunitaire de l’hôte. Dans les suppresseurs d’élite, les lymphocytes T cytotoxiques sont Il est concevable que la destruction des cellules infectées par les lymphocytes T cytotoxiques puisse ne pas être aussi efficace chez les suppresseurs d’élite avec des charges virales plus élevées et des fluctuations plus importantes de la charge virale. dynamique de la charge virale comme chez les individus avec des charges virales plus faibles Un plus grand degré de réplication continue peut se produire parce que le mécanisme moins efficace de lymphocytes T cytotoxiques prend du temps pour répondre et contrôler les nouveaux cas d’infection. des isolats de VIH capables de se répliquer [10], avaient des charges virales indétectables à plusieurs reprises, ce qui suggère que, dans certains cas, Dans certains cas, les facteurs de l’hôte peuvent être aussi efficaces que la multithérapie pour contrôler la réplication des isolats virulents du VIH-1. L’allèle HLA-B * 57 de l’antigène leucocytaire humain B * 57 a été fortement surreprésenté dans les suppresseurs d’élite [11]. HLA-B * 57 dans la lutte contre l’infection par le VIH-1 n’a pas encore été définie Dans notre cohorte de 14 suppresseurs d’élite, 11 étaient positifs pour le HLA-B * 57 et il ne semblait pas y avoir de relation entre la charge virale et le HLA- B * 57 données sur l’état de l’allèle non montrées Patient ES8, chez qui nous avons récupéré le virus compétent pour la réplication [10], présente une situation particulièrement intéressante; le patient est HLA-B * 57 positif et présente des mutations de fuite multiples dans les épitopes HLA-B * 57-restreints [5], mais il a maintenu des charges virales de 12-48 copies / mL pendant une année sans percée virologique. autres suppresseurs d’élite dans notre cohorte, le patient avait de faibles titres d’anticorps neutralisants [4]; Ces données peuvent suggérer que, chez certains patients, la suppression des charges virales à 1 copie / mL peut ne pas être nécessaire pour le contrôle à long terme de la réplication virale. En résumé, cette est la première étude longitudinale de la virémie faible dans les suppresseurs d’élite et la première étude dans laquelle les charges virales chez les suppresseurs d’élite et les personnes traitées par HAART ont été mesurées et comparées à l’aide d’un test de charge virale simple. différence dans les proportions de charges virales indétectables entre ces 2 cohortes; Cependant, une plus large gamme de charges virales a été observée chez les suppresseurs d’élite. Une étude plus approfondie sera nécessaire pour confirmer cette découverte. Comprendre les facteurs hôtes associés à des charges virales plus faibles peut fournir un aperçu de la façon dont les suppresseurs d’élite contrôlent la réplication virale en l’absence de traitement antirétroviral

Remerciements

Nous remercions le Dr Sarah Palmer et Ann Wiegand Institut national du cancer pour leurs conseils généreux et de nombreuses discussions utiles dans le développement du test de copie unique. Soutien financier Instituts nationaux de la santé K08 AI51191 et R56 AI73185-01A1 et Howard Hughes Medical InstitutePotential conflit d’intérêts Tous les auteurs : pas de conflits