Des titres élevés d’anticorps neutralisants spécifiques du sérotype d’adénovirus préexistants chez l’hôte permettent de prédire la réactivation virale après la transplantation de cellules souches allogéniques chez les enfants

Contexte Les infections à adénovirus humain HAdV sont fréquentes chez les enfants après transplantation de cellules souches allogéniques et peuvent devenir mortelles. Ces infections se produisent par réactivation de virus endogène ou transmission par greffe reste controversée. Méthodologies Dans une cohorte de patients pédiatriques Les titres NAb des anticorps neutralisants ont été mesurés in vitro au moyen d’un test de neutralisation virale.Résultats Chez les patients, l’infection a été limitée au site tel que démontré par culture seulement, et chez les patients l’infection par HAdV Les sérotypes de HAdV les plus fréquemment rencontrés ont provoqué des épisodes infectieux après SCT Les titres sérologiques de NAb contre ces sérotypes de HAdV ont été mesurés avant et après la transplantation. Des titres élevés de NAb contre un certain sérotype chez le receveur avant le SCT, reflétant infection précédente, est apparue prédisposer à une infection par le même sérotype après SCT Dans le seul cas d’échantillons indépendants de matériel de greffe, un très faible taux d’ADN HAdV a été détecté. Des réponses anticorps après SCT ont été détectées dans des épisodes infectieux. Conclusions Ces données suggèrent que les complications adénovirales après SCT sont causée par la réactivation du HAdV persistant endogène plutôt que par une infection de novo du donneur ou de l’environnement Cette découverte peut offrir une stratégie de traitement prophylactique des patients à haut risque avant le SCT pour prévenir les complications infectieuses après SCT allogénique

Transplantation de cellules souches allogéniques SCT est un traitement pour les enfants atteints de maladies malignes ou non malignes affectant le système hématopoïétique. Dans les premiers mois suivant le conditionnement du patient et la perfusion des cellules souches donneuses, les receveurs de SCT sont sensibles aux infections virales. -incompétence, qui résulte de la chimiothérapie, irradiation, manipulation de la greffe, et des médicaments immunosuppresseurs accompagnant la transplantation Les complications virales précoces après SCT sont souvent liées au virus Epstein-Barr virus EBV et cytomégalovirus CMV, mais dans la dernière décennie disséminée, potentiellement mortelle, humaine Les infections à HAdV adénovirales sont de plus en plus reconnues En l’absence de médicaments efficaces contre les infections adénovirales, des approches thérapeutiques immunologiques ont été étudiées La plupart de ces approches se concentrent sur l’utilisation de cellules T adénovirales que les infections à EBV et CMV après SCT sont un conséquence de la réactivation du virus latent, d’origine donneuse ou réceptrice, en l’absence d’immunité cellulaire adéquate. L’analyse sérologique du donneur et du receveur détermine si un receveur particulier est à risque. Pour le HAdV, il n’est actuellement pas établi si des infections post-SCT surviennent de novo ou représentent des réactivations du virus endogène [, -] Le statut sérologique du receveur et / ou du donneur est limité car la plupart des individus ont été en contact avec plusieurs sérotypes de HAdV et les tests diagnostiques détectent habituellement les anticorps contre tous les sérotypes HAdV Néanmoins, il a été rapporté que le statut sérologique du donneur est corrélé avec le risque d’infection à HAdV du receveur après SCT, ce qui suggère que le virus peut avoir été conféré avec la greffe D’autre part, la détection de l’ADN HAdV dans les excréments nasaux ou rhinopharyngés chez le receveur avant le SCT ont été rapportés comme facteur de risque de dissémination virale après SCT Sérotype Les anticorps neutralisants spécifiques NAb sont générés chez l’homme à la suite de l’infection, et les titres de ces anticorps diminuent seulement lentement A ce titre, la présence de NAb indique qu’un individu a récemment été exposé à un sérotype spécifique de HAdV déterminer si la présence de NAb spécifique au sérotype avant SCT protégerait les patients d’une infection par HAdV du même sérotype après SCT. Par conséquent, dans une cohorte de patients présentant des infections HAdV post-SCT, la survenue d’infections avec certains sérotypes HAdV après par rapport aux titres de NAb spécifiques pour les mêmes sérotypes avant SCT

PATIENTS ET MÉTHODES

Les patients

À l’unité de transplantation de cellules souches pédiatriques de Leiden Leiden Medical Center, Leiden, Pays-Bas allogéniques SCT est réalisée en conformité avec les protocoles spécifiques aux maladies des groupes de travail pertinents du Groupe européen pour la transplantation de sang et de moelle patients ont été maintenus en isolement moins semaines après SCT et a reçu la décontamination intestinale totale Aucune prophylaxie antivirale n’a été donnée; traitement préventif a été administré pour, par exemple, réactivation du CMV à base de Ganciclovir CMV basée sur la réaction en chaîne de la polymérase en temps réel [RQ-PCR] et EBV Rituximab Pour l’infection disséminée HAdV, ribavirine mg / kg / j; dose initiale, mg / kg ou cidofovir mg / kg / semaine a été administré comme décrit ailleurs La substitution intraveineuse d’immunoglobulines par IgIV a été administrée à tous les patients après un délai médian, d après SCT; gamme, – d avant à d après SCT Lapin-antithymocytes globuline ATG [thymoglobuline; mg / kg dans d] ou alemtuzumab Campath-H; mg / kg in d a été administré peu de temps avant la transplantation dans tous les SCT HLA non-identiques La prophylaxie de la GvHD chez le greffon contre l’hôte consistait en une concentration résiduelle de cyclosporine A, – μg / L, associée à une courte dose de méthotrexate chez les receveurs non-T- greffe cellulaire appauvrie Entre février et novembre, les patients ont subi une greffe Trente-sept patients ont eu au moins des cultures consécutives HAdV-positives d’excréments, écouvillon de gorge ou échantillon d’urine Treize d’entre eux avaient une infection disséminée comme démontré par la présence d’ADN HAdV dans au moins des échantillons de plasma consécutifs à ≥ × copies d’ADN / mL Cette infection disséminée a duré & gt; semaines de patients Les patients présentant une infection disséminée, ainsi que les patients en culture positive et dont on disposait d’un nombre suffisant de sérums et de sérotypes, ont été inclus Huit patients ayant reçu une greffe pendant la même période sans infection à HAdV sans infection virale connue, avec L’infection à CMV et l’infection à EBV ont été sélectionnées en tant que patients de référence non infectés. Les caractéristiques de transplantation sont présentées dans des tableaux et l’étude a été approuvée par le comité d’examen institutionnel du centre médical de l’université de Leiden.

Tableau Caractéristiques des patients atteints d’une infection à adénovirus humain UPN Sexe Âge du patient à la transplantation, années Maladie initiale Type de donneur Greffe ATG ou Campath Jour où la numération des lymphocytes T était & gt; cellules / μL Jour où le taux d’IgA a augmentéa Jour où le taux d’IgM a augmentéa Autres infections GvHD Patient vivant jour décédé Culture positive et PCR négative pour HAdV M Autre Malig UD PBSC, CD ATG EBV Non Non M Inb Err UD BM ATG EBV aGvHD grade Oui M Inb Err UD BM ATG … Non Oui M BM Défaut MMFD BM, CD ATG CMV Non Oui F TOUT UD BM ATG EBV Non Oui F AML UD BM ATG CMV Non Oui M Hemogl MFD BM ATG … grade GVHD Oui F Hemogl MFD BM ATG … aGvHD grade Oui M NOMID UD PBSC, CDb Campath … Non Oui M Inb Err MFD BM … … … Non Oui F Autre Malig UD BM ATG EBV Non Oui Culture positive et PCR positive pour HAdV TOUT UD BM, TCD ATG … EBV, HHV- Non Oui M BM Échec UD BM ATG / Campath … Non Oui M Inb Err UD PBSC, CD Campath EBV Non Non F AML UD PBSC, CDb Campath … aGvHD grade Non F AML UD BM ATG EBV Non Oui M BM Échec MMFD BM, TCD ATG / Campath … Non Oui M Hemogl UD BM Campath … Non Oui M Inb Err MMFD BM Campath CMV cGvHD Non F Autre Malig UD BM, TCD ATG … … … … Non Non M BM Échec UD CB Campath … Non Oui F Autre Malig UD BM ATG … … … EBV aGvHD grade Non F BM Échec UD PBSC, CD ATG … … … CMV Non Non F Autre Malig UD BM ATG … … … CMV Grade aGvHD Non UPN Sexe Âge du patient à la transplantation, années initiales d Type de donneur de type greffon ATG ou Jour de Campath sur lequel le nombre de lymphocytes T était & gt; cellules / μL Jour où le taux d’IgA a augmentéa Jour où le taux d’IgM a augmentéa Autres infections GvHD Patient vivant jour décédé Culture positive et PCR négative pour HAdV M Autre Malig UD PBSC, CD ATG EBV Non Non M Inb Err UD BM ATG EBV aGvHD grade Oui M Inb Err UD BM ATG … Non Oui M BM Défaut MMFD BM, CD ATG CMV Non Oui F TOUT UD BM ATG EBV Non Oui F AML UD BM ATG CMV Non Oui M Hemogl MFD BM ATG … grade GVHD Oui F Hemogl MFD BM ATG … aGvHD grade Oui M NOMID UD PBSC, CDb Campath … Non Oui M Inb Err MFD BM … … … Non Oui F Autre Malig UD BM ATG EBV Non Oui Culture positive et PCR positive pour HAdV TOUT UD BM, TCD ATG … EBV, HHV- Non Oui M BM Échec UD BM ATG / Campath … Non Oui M Inb Err UD PBSC, CD Campath EBV Non Non F AML UD PBSC, CDb Campath … aGvHD grade Non F AML UD BM ATG EBV Non Oui M BM Échec MMFD BM, TCD ATG / Campath … Non Oui M Hemogl UD BM Campath … Non Oui M Inb Err MMFD BM Campath CMV cGvHD Non F Autre Malig UD BM, TCD ATG … … … … Non Non M BM Fail UD CB Campath … Non Oui F Autre Malig UD BM ATG … … … EBV aGvHD grade Non F BM Échec UD PBSC, CD ATG … … … CMV Non Non F Autre Malig UD BM ATG … … … CMV aGvHD grade Non NOTE aGvHD , maladie du greffon contre l’hôte aiguë; ALL, leucémie lymphoblastique aiguë; AML, leucémie myéloïde aiguë; ATG / Campath, ATG suivi de Campath en raison de la toxicité; BM Fail, défaillances de la moelle osseuse; CB, sang de cordon; CD, enrichissement des cellules souches CD; CMV, cytomégalovirus; EBV, virus d’Epstein-Barr; F, femme; HAdV, adénovirus humain; Hemogl, hémoglobinopathies; HHV-, type d’herpèsvirus humain; IgA, immunoglobuline A; IgM, immunoglobuline M; Inb Err, les maladies génétiques, y compris les immunodéficiences; M, mâle; MFD, donneur de la famille apparié; MMFD, donneur familial non adapté; NOMID, maladie inflammatoire multisystémique néonatale; Autres Malig, toutes les tumeurs malignes sauf la leucémie aiguë; PBSC, cellules souches du sang périphérique; PCR, amplification en chaîne par polymérase; TCD, déplétion des lymphocytes T en utilisant une rosette E; UD, donneur non apparenté; UPN, numéro de patient unique Une journée au cours de laquelle il y a eu une augmentation substantielle et soutenue de l’adénocarcinome à cellules IgA ou IgM de niveau.

Caractéristiques du tableau de l’adénovirus humain – groupe de référence non infecté UPN Sexe Âge du patient lors de la transplantation, années Maladie initiale Type de donneur Greffe ATG ou jour de Campath sur lequel la numération des lymphocytes T était & gt; cellules / μL Jour où le taux d’IgA a augmentéa Jour où le taux d’IgM a augmentéa Autres infections GvHD Patient vivant jour décédé M Inb Err UD BM, TCD ATG EBV Non Oui F Autre Malig UD BM ATG … Non Oui F Inb Err UD PBSC, CDb ATG … EBV Non Oui F Inb Err UD BM, TCD ATG CMV Non Oui F Autre Malig MFD CB … … … … Non Oui M TOUT UD BM ATG … … … aGvHD grade Oui M TOUT UD BM ATG … EBV aGvHD grade Non F BM Fail MMFD PBSC, CDb ATG / Camp … … Non Oui UPN Sexe Âge du patient à la transplantation, ans Maladie initiale Type de donneur Greffe ATG ou Campath Jour où la numération des lymphocytes T était & gt; cellules / μL Jour où le taux d’IgA a augmentéa Jour où le taux d’IgM a augmentéa Autres infections GvHD Patient vivant jour décédé M Inb Err UD BM, TCD ATG EBV Non Oui F Autre Malig UD BM ATG … Non Oui F Inb Err UD PBSC, CDb ATG … EBV Non Oui F Inb Err UD BM, TCD ATG CMV Non Oui F Autre Malig MFD CB … … … … Non Oui M TOUT UD BM ATG … … … aGvHD grade Oui M TOUT UD BM ATG … EBV aGvHD grade Non F BM Fail MMFD PBSC, CDb ATG / Camp … … Non Oui NOTE aGvHD, greffe aiguë versus hôte; ALL, leucémie lymphoblastique aiguë; ATG / Campath, ATG suivi de Campath en raison de la toxicité; BM Fail, défaillances de la moelle osseuse; CB, sang de cordon; CD, enrichissement des cellules souches CD; CMV, cytomégalovirus; EBV, virus d’Epstein-Barr; F, femme; IgA, immunoglobuline A; IgM, immunoglobuline M; Inb Err, les maladies génétiques, y compris les immunodéficiences; M, mâle; MFD, donneur de la famille apparié; MMFD, donneur familial non adapté; Autres Malig, toutes les tumeurs malignes sauf la leucémie aiguë; TCD, déplétion des lymphocytes T en utilisant une rosette E; UD, donneur non apparenté; UPN, numéro de patient unique Une journée au cours de laquelle il y a eu une augmentation substantielle et soutenue de l’adénocarcinome à cellules IgA ou IgM de niveau.

Surveillance du HAdV

Des échantillons d’excréments, d’urine et d’écouvillons ont été prélevés à intervalles hebdomadaires directement après SCT et à des intervalles bihebdomadaires ou mensuels des mois après la détection de SCT HAdV après culture par immunofluorescence Les sérotypes ont été déterminés en% de cultures positives par des tests de neutralisation décrits ailleurs [ Des échantillons de plasma obtenus à des moments similaires ont été analysés par RQ-PCR pour la présence d’ADN HAdV Pour étudier la transmission possible du HAdV du donneur, des échantillons de matériel de greffe ont été prélevés entre et cela représente une cohorte différente de patients. Les cellules nucléées dans μL de solution saline tamponnée au phosphate ont été conservées à – ° C L’ADN a été isolé sur une plateforme d’extraction MagNApure LC Roche Diagnostics en utilisant le kit Total Nucleic Acid Ensuite, l’ADN a été soumis à RQ-PCR pour l’ADN HAdV et β-globine Ce dernier a été utilisé pour la normalisation et le contrôle de l’inhibition

NAb spécifique au HAdV

Les sérotypes HAdV ont été fournis par M Havenga Crucell, Leiden, Pays-Bas. Pour le test de neutralisation des anticorps, des lysats bruts de cellules infectées par HAdV Hep ont été fournis par le laboratoire médical J de Jong Erasmus Medical Center de Rotterdam. ou A ont été générés Pour déterminer les titres de NAb, des échantillons de sérum ont été inactivés par la chaleur, dilués de: à:, occasionnellement à: ,, et ajoutés aux puits contenant le lysat HAdV × TCID, suivi de h incubation à ° C Des cellules Hep ou A ont été ajoutées et l’effet cytopathique a été noté après d Le titre de neutralisation était la dilution sérique la plus élevée à laquelle l’effet cytopathique n’était plus observé Les échantillons de sérum étaient analysés pour les anticorps contre les sérotypes,, et, au moins les temps suivants: avant le SCT et au,,, et mois après SCT ou jusqu’à la mort du patient Des échantillons de sérum de donneur ont été obtenus des semaines avant ou à la récolte de la greffe. La réponse a été définie comme une augmentation post-SCT du titre NAb. f ≥ à un niveau au moins confirmé au moins une fois dans un échantillon de sérum subséquent Pour éviter les artefacts dus à l’administration d’IgIV, l’augmentation des titres de NAb observée au début du traitement par IgIV n’a pas été considérée comme une réponse

Reconstitution immunologique

Les numérations leucocytaires et lymphocytaires ont été déterminées régulièrement au cours des premiers mois suivant l ‘analyse SCT Subset des cellules mononucléées du sang périphérique (CDT, CDT, tueur naturel) et des lymphocytes B toutes les semaines par cytométrie en flux et immunoglobuline A IgA. dans les échantillons de sérum ont été déterminées par néphélométrie Les premiers jours de lymphocytes T comptés à & gt; × cellules / cellules L et B comptées à & gt; × cellules / L, et les jours d’apparition des augmentations persistantes des taux d’IgA et d’IgM, respectivement, sont indiqués dans les tableaux et

RÉSULTATS

Infections à HAdV après SCT

Dans la cohorte de patients étudiés, le HAdV a été détecté pour la première fois par culture à une médiane de d, après le SCT. Treize patients avaient également de l’ADN viral présent dans leur plasma détecté par PCR pendant au moins une semaine. la culture a été détectée à une médiane de d, – d après SCT et l’ADN a été détecté pour la première fois dans le plasma à une médiane de d, – d après SCT pour une période médiane de d

Tableau Infection adénovirale humaine et détection de la réponse dans des anticorps neutralisants UPN Culture de premier jour positivea Détection d’infection par culture; détection de la réponse dans le sérotype sérotype Serotype Sérotype Sérotype Sérique culture positive, PCR négatif; ; -; -; ; ; ; ; -; -; ; b -; ; ; ; ; -; -; ; – -; Culture de fèces positive, PCR positive; b -; ; ; ; ; ; -; ; -; -; ; -; c -; ; -; ; -; -; -; ; – -; ; -; – UPN Premier jour culture positivea Détection de l’infection par la culture; détection de la réponse dans le sérotype sérotype Serotype Sérotype Sérotype Sérique culture positive, PCR négatif; ; -; -; ; ; ; ; -; -; ; b -; ; ; ; ; -; -; ; – -; Culture de fèces positive, PCR positive; b -; ; ; ; ; ; -; ; -; -; ; -; c -; ; -; ; -; -; -; ; – -; ; -; – NOTE, infection adénovirus humain HAdV détectée par culture ou anticorps neutralisant la réponse NAb détectée; -, aucune infection HAdV détectée ou aucune réponse NAb détectée; espace, aucune infection et aucune réponse détectée; PCR, amplification en chaîne par polymérasePremière journée de culture positive d’écouvillon de gorge, d’excrément ou d’urine après infection par greffe de cellules souches L’infection par HbAv a été sérotypée après détection de la réponse NAb après la troisième transplantation de cellules souchesVariation de souches de HAdV isolées chez les patients appartenant au sérotype, au sérotype, au sérotype, au sérotype et au sérotype Tableau Il y avait des infections supplémentaires avec des sérotypes qui ont été observés une seule fois,,, et Dans cette étude, nous nous sommes concentrés sur les infections avec les souches HAdV les plus fréquemment détectées. , souches appartenant à des sérotypes,,,, et, qui ont entraîné des épisodes infectieux dans cette cohorte de patients Huit patients ont eu des infections avec & gt; table de sérotype

Titres de NAb chez les destinataires avant le SCT

Dans la section précédente, il a été établi que les infections se sont produites après SCT Ensuite, la relation entre l’apparition d’une infection après SCT et le titre préexistant de NAb avant SCT a été étudiée en déterminant les titres pré-SCT de NAb contre le même panel de sérotypes de HAdV chez tous les patients Supplémentaire Tableau A Les titres pré-SCT contre les sérotypes détectés dans les épisodes infectieux, détectés par culture, après SCT ont été comparés aux titres pré-SCT des observations dans lesquelles aucune infection post-SCT avec les sérotypes respectifs ont été détectés Figure; Tableau supplémentaire A Pour chacun des sérotypes, le titre moyen pré-SCT était plus élevé si une infection suivait après SCT que s’il n’y avait pas d’infection détectée Il n’y avait pas de différence dans les titres préexistants entre les patients et les patients sans ADN viral dans le plasma, indiquant l’absence d’influence des titres NAb pré-SCT sur la probabilité de dissémination Supplémentaire Tableau A

Figure Chez les patients ayant développé une infection à HAdV humaine adénovirus et chez des patients n’ayant pas développé d’infection, les titres de NAb contre les sérotypes de HAdV ont été mesurés dans des échantillons de sérum – semaines avant SCT A et chez leurs donneurs B Les titres sont représentés par des valeurs log Pour chaque sérotype, les titres avant SCT et leurs moyennes ou titres chez les donneurs sont comparés entre les cas dans lesquels une infection par ce sérotype a suivi SCT et les cas non infectés par ce sérotype s’est produite et avec le groupe de référence La signification a été déterminée avec le test t de Student pour les échantillons indépendants * P ≤; ** P ≤; *** P ≤ Figure View largeTélécharger les diapositives des anticorps neutralisants NAb chez les patients avant transplantation de cellules souches SCT et chez leurs donneurs Chez les patients ayant développé une infection à adénovirus humain HAdV et chez les patients n’ayant pas développé d’infection, les titres de NAb contre serotypes de HAdV ont été mesurés. échantillons de sérum – semaines avant SCT A et chez leurs donneurs B Les titres sont représentés par des valeurs log Pour chaque sérotype, les titres avant SCT et leurs moyennes ou titres chez les donneurs sont comparés entre les cas dans lesquels une infection par ce sérotype a suivi SCT et les cas aucune infection avec ce sérotype n’est survenue et avec le groupe de référence La signification a été déterminée avec le test t de Student pour les échantillons indépendants * P ≤; ** P ≤; *** P ≤ Pour comparaison, les titres pré-SCT ont été déterminés chez des patients du groupe de référence non infecté sans infection par HAdV Figure; Tableau supplémentaire B Les titres moyens contre le même panel de sérotypes chez les patients de référence non infectés étaient similaires aux titres moyens contre les sérotypes qui n’ont pas provoqué d’infection après SCT chez les patients infectés avec d’autres sérotypes. sérotype avant SCT corrélé avec un risque accru d’avoir une infection après SCT avec ce sérotype

Titres de NAb dans les donneurs de greffe

Comme il a été suggéré que les receveurs ayant reçu des greffes avec des titres d’anticorps anti-HAdV élevés risquaient de développer une infection après SCT, nous avons également mesuré les titres NAb par rapport aux mêmes sérotypes dans les échantillons sériques des donneurs Figure; Tableaux supplémentaires A et B Pour les sérotypes HAdV, et, les titres n’étaient pas significativement différents, alors que pour les sérotypes HAdV et, il y avait une tendance similaire, quoique moins significative, chez les donneurs, à savoir des titres plus élevés en cas d’infection

HAdV dans les greffes de cellules souches

Pour étudier la possibilité que HAdV soit transmis du donneur au receveur, la présence d’ADN viral dans le matériel de greffe a été mesurée par PCR. Aucun matériel de greffe n’a été laissé correspondant aux mêmes patients. Au lieu de cela, des échantillons ont été prélevés entre et qui n’ont subi aucune greffe. des manipulations, une déplétion des lymphocytes T ou un enrichissement en CD, et une PCR a été effectuée; dans les cas où les receveurs ont développé une infection à HAdV après SCT, et dans les cas où aucune infection à HAdV ne s’est produite, le Tableau 1 des échantillons contenait un très faible niveau d’ADN de HAdV & lt; copies par × cellules, mais le receveur de cette greffe n’a pas développé d’infection HAdV après SCT Tableau Bien que nous ne pouvons pas exclure formellement la possibilité de transfert de HAdV de la greffe chez les patients analysés pour NAb, il n’y avait aucune preuve à l’appui de cette notion

Tableau de détection de l’ADN adénoviral humain par réaction en chaîne de la polymérase dans le matériel de greffe Nombre de patients réactivant HAdV entre et échantillons testés Non Oui Nombre total de patients Greffe Greffe complète Déplétion de cellules T CD enrichi Donneur Dons de famille appariés Donneur non apparenté Donneur de famille déphasé Source Moelle osseuse Sang périphérique cellules souches Sang de cordon Total Nombre de patients réactivant HAdV entre et échantillon Testé Non Oui Nombre total de patients Greffe Greffe complète Déplétion de lymphocytes T CD enrichi Donneur Dons familiaux appariés Dons non apparentés Dons de famille non appariés Source Moelle osseuse Sang périphérique Cellules sanguines Total du sang Le matériel de greffe a été échantillonné pour une réaction en chaîne de la polymérase entre une cohorte de patientes indépendantes et des greffes données à des patients réactivant et non réactivant une infection à adénovirus humain HAdV. des copies de HAdV par cellules d’ADN viral détectées; il s’agissait d’une greffe de moelle osseuse complète, provenant d’un donneur de la famille apparié, donné à un patient qui n’a pas réactivé l’infection par le HAdV.

Réponses NAb après SCT

Après SCT, les patients ont été capables de générer des réponses NAb spécifiques au sérotype. Par exemple, le patient numéro de patient unique UPN monté réponses consécutives NAb contre différents sérotypes,, et la figure 3 des sérotypes ont également été détectés par culture, mais dans le cas où une réponse a été observée Les réponses NAb se sont développées à une médiane de d, – d après SCT et développées à la fois pendant et après l’administration d’IgIV Tableau supplémentaire Vingt-et-une des réponses NAb chez les patients qui ont eu une infection avec le même sérotype, tel que détecté par la culture

Figure View largeTélécharger slideHuman adenovirus HAdV anticorps neutralisants spécifiques du sérotype Nab réponses chez les patients après transplantation de cellules souches SCT Titres spécifiques NAb axe y-droit contre les sérotypes HAdV,,,, et ont été mesurés dans des échantillons sériques de patients UPN A et UPN B après SCT la charge d’ADN viral dans l’axe des ordonnées à gauche a été mesurée en carrés pleins; dans l’UPN du patient, aucun ADN HAdV n’a été détecté dans le plasma. Les résultats des cultures de cercles d’échantillons de fèces et d’échantillons d’urine sont indiqués sous le graphique; Les cultures ouvertes ont été sérotypées comme indiqué par les flèches L’administration d’immunoglobulines intraveineuses IVIG et de patients traités par le rituximab UPN est indiquée en haut du graphique PCR, réaction en chaîne de la polyméraseFigure View largeTélécharger une diapositiveHuman adenovirus HAdV sérotype-specific neutralizing antibody Réponses Nab chez les patients après transplantation de cellules souches SCT Titres spécifiques NAb axe y-droit contre les sérotypes HAdV,,,, et ont été mesurés dans des échantillons sériques de patients UPN A et UPN B après SCT La charge d’ADN viral dans l’axe gauche gauche plasma a été mesurée carrés remplis; dans l’UPN du patient, aucun ADN HAdV n’a été détecté dans le plasma. Les résultats des cultures de cercles d’échantillons de fèces et d’échantillons d’urine sont indiqués sous le graphique; Les cultures ouvertes ont été sérotypées comme indiqué par des flèches. L’administration d’immunoglobulines intraveineuses IVIG et de rituximab au patient UPN est indiquée en haut du graphique PCR, réaction en chaîne par polymérase. Dans les cas où une réponse immunitaire a été observée Le sérotype HAdV n’a pas été détecté par culture. Une explication de ces observations pourrait être que des cultures appropriées et / ou des données de sérotypage manquaient ou, en cas d’infections simultanées multiples, des souches mineures peuvent avoir été envahies par des souches abondamment présentes. l’infection par le sérotype HAdV du patient, et ce virus peut avoir été la souche dominante dans toutes les cultures positives, occultant ainsi d’autres souches, par exemple, et dans les cas des patients aucune réponse humorale n’a été observée malgré la détection d’une infection par La culture Chez les patients, il y avait des explications possibles pour le manque de réponse par exemple, la récupération tardive de l’immunité humorale comme reflétée par des augmentations des niveaux d’IgM et / ou d’IgA UPN, UPN et UPN, l’apparition de patients GvHD UPN et UPN, ou un court suivi des patients UPN et UPN Dans les autres patients patients UPN, UPN, UPN, UPN et UPN, les raisons de l’absence de réponse n’étaient pas évidentes

DISCUSSION

Chez les patients infectés, ≥ sérotypes HAdV ont été identifiés par culture Chez les patients, les réponses NAb ont été observées contre au moins le sérotype, et chez les patients, ils ont été observés contre ≥ sérotypes, confirmant la présence de sérotypes multiples dans Chez chaque patient, aucune réponse NAb à l’un des virus n’a été observée, et UPN, UPN, UPN et UPN ont en effet montré une reconstitution immunitaire retardée ou un suivi trop court pour détecter les réponses. l’absence de réponses NAb, par exemple, chez les patients UPN, UPN et UPN peut être le manque de lymphocytes T HAdV-spécifiques, malgré la reconstitution des comptes de cellules T En général, la reconstitution rapide des cellules T spécifiques HAdV est corrélée avec une fréquence réduite de Les infections à HAdV et, en outre, les lymphocytes T répondant aux antigènes HAdV sont détectés pendant ou juste après l’élimination du virus [,,, -] Les lymphocytes T spécifiques à HAdV sont également nécessaires pour le développement d’une Une réponse spécifique au NAb et une connaissance détaillée de l’immunité cellulaire spécifique au HAdV chez ces patients auraient pu contribuer à l’interprétation des résultats. Dans le groupe des patients non infectés, les titres NAb avant SCT étaient bas, suggérant que la probabilité de réactivation en soi Cependant, d’autres paramètres tels que l’immunité cellulaire spécifique au HAdV peuvent également être pertinents et devraient être pris en compte dans une étude plus large sur les patients non infectés. Un rôle potentiel pour les anticorps est la prévention de l’infection. fibrose kystique que la présence de NAb contre HAdV en corrélation avec une fréquence réduite de l’infection Dans notre étude, un titre élevé de sérum de NAb contre un sérotype HAdV avant SCT n’a pas protégé le patient de devenir infecté après SCT Ceci est contraire à ce qui aurait pu être attendu sur la base d’autres infections virales, telles que la grippe et l’hépatite A, où les anticorps seuls suffisent Pour prévenir l’infection Les premières études chez les recrues militaires ont montré qu’un vaccin adénoviral pouvait protéger contre l’infection après une exposition ultérieure Bien que les réponses anticorps aient été mesurées dans ces études, il est difficile de séparer l’effet protecteur de ces anticorps. la protection conférée par l’immunité cellulaire Chez certains patients, nous avons observé des infections progressives en présence de titres relativement élevés de NAb, indiquant que NAb ne limitait pas une infection en cours Cependant, dans la présente étude, des titres élevés de NAb préexistants chez le receveur avant SCT semble être en corrélation avec une probabilité plus élevée d’infection après SCT au lieu de prévenir l’infection Cela suggère qu’une exposition récente à un sérotype HAdV spécifique, comme reflété par un titre relativement élevé de NAb avant SCT, peut conduire à une probabilité plus élevée de l’infection après SCT Ceci, ainsi que l’absence d’ADN viral dans le matériel de greffe confirmant un rapport précédent, suggère que l’infection clinique par HAdV après SCT semble être une réactivation d’un virus précédemment rencontré plutôt qu’une infection de novo ou un transfert de virus du donneur Comment et où le virus persiste est un sujet de débat Aucun mécanisme moléculaire soutenant la latence de adénovirus ont été décrits, mais la persistance de l’adénovirus et / ou de l’ADN dans divers endroits, comme les amygdales, a été rapportée Il a déjà été rapporté il y a plusieurs décennies que la présence persistante de sérotypes HAdV Une telle infection persistante pourrait facilement se propager lorsque le système immunitaire est affaibli, comme c’est le cas après SCT allogénique Chez les patients atteints d’infection à HAdV disséminée, la culture positivité temps médian après SCT, d dans les échantillons d’excréments, ou occasionnellement dans des échantillons d’urine ou de prélèvements de gorge, ont précédé la présence de l’ADN dans le temps médian du plasma après la SCT, d, conformément à l’hypothèse que Une infection de novo a été rapportée pour le sérotype HAdV: une éclosion nosocomiale de plusieurs patients infectés par une souche unique dans une unité de transplantation de cellules souches pédiatriques À cet égard, il est à noter que dans notre cohorte de patients, les infections Les sérotypes HAdV A, comme ceux avec les sérotypes de l’espèce C, sont également précédés d’un titre pré-SCT plus élevé, ce qui serait plus conforme au concept de réactivation. La découverte que la réactivation d’une infection virale endogène est une explication probable du HAdV clinique Les infections après SCT pourraient avoir des conséquences pratiques Parce qu’il est difficile d’intervenir pharmacologiquement avec des infections à HAdV en cours, il pourrait être possible de dépister les patients avant la SCT pour détecter la présence d’une infection récente ou active et retarder le SCT ou le traiter avec des médicaments antiviraux. Le cidofovir réduit les charges virales Une telle approche prophylactique pourrait réduire l’apparition de réactivations dans Période SCT

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