Effet de la supplémentation vitaminique prénatale sur les niveaux génitaux inférieurs de type VIH et de type interleukine β aux semaines de gestation

Nous avons étudié l’effet des compléments vitaminiques sur l’excrétion génitale du VIH et l’interleukine-β IL-β, un marqueur cytokinique de l’inflammation vaginale et de l’élimination des micronutriments dans le tractus génital inférieur. promotion de l’infection par le VIH Consentement Les femmes enceintes infectées par le VIH ont été randomisées pour recevoir une supplémentation quotidienne en vitamine A et / ou en multivitamines. Complexes B, C et E avec utilisation d’un modèle factoriel Des échantillons de lavage cervico-vaginal ont été obtenus peu avant l’accouchement. les femmes ayant reçu de la vitamine A avaient des taux détectables de VIH- en CVL%, comparées à celles n’ayant pas reçu de vitamine A% P =, par analyse multivariée. Le complexe multivitaminé B, C et E n’avait aucun effet sur le risque d’excrétion virale. Les résultats soulèvent des inquiétudes quant à l’utilisation de suppléments de vitamine A par les femmes infectées par le VIH L’utilisation de suppléments multivitaminiques prénataux, y compris les vitamines du complexe B, C et E, devrait être continué malgré l’absence d’effet sur la transmission du VIH en raison des effets positifs signalés précédemment sur la santé maternelle et les résultats de la grossesse

L’infection par le VIH est un problème majeur de santé publique dans le monde entier, en particulier chez les femmes des pays en développement. Environ% de la population de & gt; En Afrique subsaharienne, environ un million de personnes vivant avec le VIH / SIDA étaient originaires d’Afrique subsaharienne et environ la moitié d’entre elles étaient des femmes . La prévalence de l’infection à VIH chez les femmes enceintes est de ~% à Dar es Salaam, Tanzanie, Environ% de ces femmes transmettent le virus à leur bébé par les voies transplacentaire, intrapartum et d’allaitement. Le statut en micronutriments est associé à l’intégrité des revêtements épithéliaux ainsi qu’à l’immunité systémique et muqueuse, y compris l’intégrité génitale inférieure , et la supplémentation a été proposée comme une intervention potentiellement peu coûteuse qui pourrait réduire le risque de transmission du VIH de la mère à l’enfant. Dans des études observationnelles chez les femmes du Kenya de la vitamine A ont été associés à une importante excrétion du VIH dans les voies génitales inférieures, ce qui a fourni un mécanisme pour l’effet bénéfique potentiel des suppléments de vitamine A sur le risque intrapartum. k de la transmission du VIH Les résultats d’un essai randomisé contrôlé contre placebo mené chez des femmes non enceintes du Kenya ont toutefois indiqué que les suppléments de vitamine A n’avaient aucun effet sur l’excrétion virale génitale Les rôles des autres vitamines dans l’intégrité de l’épithélium génital inférieur Nous avons examiné cette question dans le contexte d’une étude contrôlée randomisée sur l’effet de la supplémentation vitaminique quotidienne sur la transmission verticale du VIH et les résultats connexes chez les femmes enceintes qui ont été enrôlées à Dar es Salaam, Tanzanie. Nous avons évalué l’effet de la supplémentation sur risque d’excrétion du VIH par le tractus génital inférieur et sur les niveaux d’IL-β, un marqueur cytokinique de l’inflammation vaginale qui favorise la réplication du VIH par l’activation de l’amplificateur NFkB de la longue répétition terminale du virus

Méthodes

Les contrôles positifs ont été traités avec les échantillons de patients. L’ARN a été isolé selon les instructions du fabricant et dissous dans des ul de l’eau traitée au diéthylpyrocarbonate. Cinq microlitres de l’ARN ont été transcrits en une réaction de -μL L’intégralité de l’ADNc résultant a été amplifiée par PCR. La PCR a été réalisée avec une paire d’amorces modifiées contenant de l’inosine pour assurer la reconnaissance de tous les sous-types de VIH existants dans notre cohorte. Le mélange PCR contenait également nmol / L de dUTP Roche marqué à la digoxigénine DIG pour permettre aux produits PCR de Les produits PCR ont été analysés par ELISA En bref, les produits de PCR marqués au DIG ont été liés à la microplaque enrobée de streptavidine Roche via une sonde biotine et ont réagi avec le test DIG. conjugué anticorps anti-DIG-peroxydase de raifort HRP pendant l’incubation à ° C La densité optique OD a été mesurée à nm après addition Un échantillon standard a été généré en utilisant les contrôles standards externes. La teneur initiale en virus dans chaque échantillon a été déterminée en traçant sa DO sur la courbe standard externe. Les résultats ont été exprimés en copies VIH-ARN par échantillon CVL et ont été calculés comme suit: pas de copies par μL d’échantillon d’entrée transcrit en reverse PCR × échantillons d’entrée par mL d’aliquote CVL × pas d’aliquotes CVL La limite inférieure de détection du test était des copies de HIV-RNA / mL; cependant, parce que nous avons seulement ajouté μL d’échantillon au dosage, dilué en mL dans le réactif Trizol, la limite quantitative par échantillon était des copies. Les niveaux d’IL-β dans les échantillons CVL étaient mesurés comme décrit ailleurs , en utilisant des systèmes ELISA R & D sur Échantillons de LCV dilués: dans du sérum physiologique Les concentrations de cytokine ont été calculées par analyse de régression quadratique sur la base de densités optiques transformées logarithmiquementAnalyse des données Comme nous n’avons commencé à obtenir des échantillons CVL que bien après le début de l’étude, A condition de fournir un spécimen et d’avoir des spécimens adéquats pour déterminer les niveaux de VIH et d’IL-β. Comparées aux femmes qui n’ont pas fourni d’échantillon, celles qui ont fourni des échantillons étaient plus âgées, avaient des circonférence du bras, étaient plus susceptibles de déclarer avoir des ulcères génitaux ou des ulcères buccaux pendant la grossesse indexée, étaient plus susceptibles de recevoir un diagnostic de gonorrhée ou Cependant, les femmes dans les groupes n’étaient pas différentes en ce qui concerne le nombre de cellules CD et CD, la charge virale plasmatique, les niveaux de vitamines A et E et l’hémoglobine. Nous avons examiné l’effet des suppléments sur l’excrétion des voies génitales du VIH et les taux d’IL-β. Nous avons examiné l’effet des suppléments sur l’excrétion génitale du VIH et les taux d’IL-β. Les distributions des variables sociodémographiques, de l’infection à l’inclusion et des indicateurs de santé lors du suivi au sein des groupes de traitement ont été examinées afin de vérifier qu’il n’y avait pas d’effets indésirables. aucune différence sous-jacente entre les groupes de traitement, l’excrétion du VIH a été analysée en tant que variable continue, un dichotomique v Nous avons comparé l’effet de la prise de multivitamines avec celui de ne pas recevoir de multivitamines, en tant que variable continue et en tant que quartiles. Nous avons testé l’effet univarié des suppléments sur des critères d’évaluation continus à l’aide du test de la somme des rangs de Wilcoxon, et nous avons comparé les résultats catégoriels à l’aide du test [. La régression logistique a été utilisée pour ajuster le potentiel. confusion dans l’analyse des points de terminaison dichotomiques Pour les points de terminaison continue, les modèles de régression mixte multivariée ont été ajustés en utilisant la variance empirique, éliminant ainsi l’exigence habituelle de normalité parmi les résidus Les variables suivantes ont été considérées dans le modèle multivarié: la taille, le poids, l’état matrimonial, l’éducation, la quantité dépensée pour la nourriture par jour, l’histoire sexuelle et la grossesse ories, stade de l’infection à VIH au départ, numération des cellules CD et CD au départ, MST au départ et symptômes au départ Toutes les valeurs de P déclarées sont spontanées; signification statistique dans cette étude est définie comme P & lt; Le protocole d’étude a été approuvé par le Comité de recherche et publications du Collège des sciences de la santé de l’Université Muhimbili, le Comité d’éthique du Programme national de lutte contre le SIDA du Ministère de la Santé tanzanien et le Comité de révision institutionnelle de la Harvard School of Public Health

Résultats

Les femmes assignées aux divers groupes de traitement étaient similaires en ce qui concerne les caractéristiques de base montrées dans le tableau L’adhésion à l’utilisation de supplément a été évaluée comme le nombre de comprimés absents des bouteilles retournées divisé par le nombre total de comprimés que l’individu aurait dû prendre. Les femmes ont reçu les suppléments pendant une durée moyenne ± écart-type de ± semaines au moment où les échantillons CVL utilisés dans ces analyses ont été obtenus. Il n’y avait pas de différence dans la durée d’utilisation des suppléments entre les différents groupes de traitement.

Tableau View largeTélécharger les caractéristiques de base des femmes enceintes infectées par le VIH dans les groupes d’intervention et de contrôle à Dar es Salaam, en Tanzanie, qui ont reçu des multivitamines et / ou de la vitamine A ou reçu un placebo. Dar es Salaam, Tanzanie, qui ont reçu des multivitamines et / ou de la vitamine A ou reçu un placebo. La prise de multivitamines sans vitamine A n’a eu aucun effet sur le risque d’excrétion virale, qu’elle soit définie comme variable continue ou comme critère catégorique dans les analyses univariées et multivariées La différence entre les bras si la charge virale génitale inférieure était utilisée comme variable continue était marginalement significative P = Les femmes ayant reçu de la vitamine A avaient des valeurs plus élevées pour la charge virale génitale inférieure, les copies / CVL; médiane, copies / CVL, par rapport aux femmes qui n’ont pas reçu de vitamine A moyenne, copies / CVL; médiane, copies / CVL La vitamine A était associée à un risque significativement plus élevé d’excrétion virale utilisée comme variable dichotomique Parmi les femmes du groupe vitamine A,% présentaient un virus détectable dans le tractus génital inférieur, contre% des femmes qui ne recevaient pas de vitamine AP = dans le tableau des analyses univariées et multivariées

Tableau View largeTéléchargement de l’effet de la prise de multivitamines et / ou de vitamine A sur l’excrétion génitale chez les femmes enceintes séropositives à Dar es Salaam, TanzanieTable View largeTélécharger une diapositiveEffet de la prise de multivitamines et / ou de vitamine A sur l’excrétion génitale Femmes enceintes séropositives à Dar es Salaam, TanzanieNous avons ensuite examiné l’effet de la supplémentation sur la concentration d’IL-β dans les échantillons CVL La concentration médiane d’IL-β n’était pas différente dans les bras multivitamines ou vitamines A P = et P =, Tableau Les résultats des modèles multivariés étaient similaires

Tableau View largeTéléchargement de l’effet de recevoir des multivitamines et / ou de la vitamine A sur les taux d’interleukine-β IL-β génitale inférieure dans les échantillons de lavage cervico-vaginal des femmes enceintes séropositives à Dar es Salaam, TanzanieTable View largeTélécharger slideÉffect des multivitamines et / ou des vitamines A sur les niveaux d’interleukine-β IL-β des parties génitales inférieures dans les échantillons de lavage cervico-vaginal des femmes enceintes séropositives à Dar es Salaam, Tanzanie

Discussion

o recevoir une cure de seulement une semaine de vitamine A préformée; complexe B de multivitamines, C, E et sélénium; ou placebo La prise de vitamine A seule n’a eu aucun effet sur le risque d’excrétion, comparé au placebo Contrairement à l’essai en Tanzanie, celui au Kenya concernait des femmes non enceintes. Les suppléments étaient fournis pour une période plus courte au Kenya, comparé à une durée médiane de ~ Semaines dans l’essai en Tanzanie Les doses fournies dans chaque essai étaient également différentes: au Kenya, l’UI de vitamine A préformée était administrée par jour, comparée à l’UI de vitamine A préformée et de mg de ß-carotène par jour dans l’essai de Tanzanie. sur la vitamine A sont contraires aux résultats d’études observationnelles du Kenya, dans lesquelles les faibles taux plasmatiques de rétinol étaient associés à un risque accru d’excrétion virale génitale inférieure Ces dernières études sont toutefois limitées par le fait que la vitamine A plasmatique les concentrations sont un mauvais indicateur de l’état de la vitamine A pendant les états d’infection, car la concentration peut être réduite en raison de la réponse de phase aiguë à l’infection, malgré des niveaux adéquats de sto Ce point a été confirmé dans le contexte de l’infection par le VIH Il n’est pas possible de démêler les effets de la vitamine A préformée sur ceux du β-carotène dans l’étude tanzanienne car les deux sont présents dans le même supplément. des effets protecteurs sur le système immunitaire , in vitro et des études humaines observationnelles suggèrent que la vitamine A peut être associée à une réplication virale accrue qui pourrait avoir contribué aux effets indésirables observés. Dans des études in vitro, la vitamine A était associée à une réplication accrue du VIH. , bien que, dans d’autres études, la vitamine A ait diminué la réplication du VIH- L’incohérence des résultats de ces études in vitro n’est pas inattendue, étant donné les différences dans les doses de vitamine A et dans les lignées cellulaires utilisées dans les études , parmi d ‘autres problèmes de conception Dans une étude observationnelle prospective impliquant des hommes séronégatifs, les taux plasmatiques de rétinol au départ étaient positivement associés au risque de séroconversion au VIH. nversion , suggérant un rôle de la vitamine A dans la transmission hétérosexuelle Les auteurs de cette dernière étude émettent l’hypothèse qu’une augmentation de la réplication du VIH peut être favorisée par une différenciation accrue des cellules myéloïdes et lymphoïdes par une supplémentation en vitamine A et peut être le résultat de Récepteurs CCR sur ces récepteurs cellulaires qui augmentent la susceptibilité à l’infection par le VIHNotre absence d’effet du complexe vitamines B, C et E sur l’excrétion virale du tractus génital est en accord avec le résultat nul sur la transmission intrapartum du risque relatif du virus; Par contre, dans l’essai du Kenya mentionné ci-dessus, le sélénium et les multivitamines ont entraîné une prévalence plus élevée de cellules infectées par le VIH quantifiables dans les échantillons vaginaux mais non cervicaux, comparativement au groupe placebo. les essais en Tanzanie et au Kenya ont utilisé des doses identiques de vitamines B, C et E, l’essai du Kenya incluait également μg de sélénium. Comme c’est le cas avec la vitamine A, le sélénium peut être une arme à double tranchant dans le traitement du VIH. Il a été montré que l’activité élevée du glutathion peroxydase induit une diminution de la réplication du VIH in vitro, une diminution importante de la viabilité et de la formation de syncytia dans les expériences avec des lignées cellulaires infectées par le VIH, accompagnée d’une augmentation de la réplication virale. D’autres facteurs peuvent également expliquer la différence dans les résultats entre les essais au Kenya et en Tanzanie. L’effet des micronutriments sur les résultats liés au VIH est susceptible d’être différent selon les états physiologiques ou pathologiques Comme indiqué précédemment, l’essai en Tanzanie a comparé les femmes enceintes avec des femmes non enceintes au Kenya; la grossesse est associée à divers changements hormonaux qui peuvent modifier l’impact des micronutriments sur les résultats. En outre, la population étudiée dans l’essai en Tanzanie avait généralement un stade moins avancé du nombre de cellules CD médianes de la maladie VIH, cellules / mm; la charge virale médiane, × copies / mL que la population étudiée dans le nombre de cellules CD médian de l’essai au Kenya, cellules / mm; Les résultats de l’étude tanzanienne indiquent que la prise de suppléments de multivitamines B, C et E a entraîné des réductions significatives des cas de perte fœtale, de faible poids à la naissance et de prématurité sévère. Le nombre de cellules CD et la concentration en hémoglobine pendant la grossesse En conséquence, les suppléments multivitaminiques sont de plus en plus utilisés dans les soins prénataux des femmes séropositives dans les pays en développement. Nos résultats soulèvent des inquiétudes concernant l’utilisation de suppléments de vitamine A et de sélénium. d’autre part, l’utilisation des suppléments de multivitamines B, C et E doit être poursuivie, malgré leur absence d’effet sur l’excrétion génitale inférieure et la transmission intrapartum du VIH, en raison de leurs effets positifs sur la santé maternelle et les issues de la grossesse

Remerciements

Nous remercions les mères et les enfants, les équipes de terrain y compris les infirmières, sages-femmes, superviseurs et personnel de laboratoire, et le personnel administratif qui a rendu l’étude possible. Nous apprécions grandement les contributions suivantes: Illuminata Ballonzi, Beth Chaplin, Max Essex, Heavengton Mshiu , Boris Renjifo, Willy Urassa, Walter Willett et tous les autres membres de la collaboration Harvard-Tanzanie; et les membres du Conseil de la sécurité et de la surveillance des données: Graham Colditz, Nicholas Horton, Valerian Kimati, Kenneth McIntosh, président Marcello Pagano et Abby Shevitz